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1、緊接前作《刺客信條：兄弟會》，現(xiàn)代刺客戴斯蒙·邁爾斯與同伴露西·斯蒂爾曼、肖恩·海斯汀及麗貝卡·克琳已在朱諾神殿尋得“第一文明”古代遺物“伊甸碎片”，而戴斯蒙于刺死露西后陷入昏迷狀態(tài)并被送返基因記憶追溯機器“Animus 2.0”以免精神崩潰。

2、于安全模式“黑房”中，戴斯蒙遇上第十六實驗體之意識，獲告悉必須進入其兩名刺客祖先阿泰爾·伊本·拉哈德以及艾吉奧·奧迪托雷·達·佛羅倫薩仍未讀取的記憶，使Animus 2.0能把三人的記憶分開，重組其意識從而蘇醒。

3、于黑房中，戴斯蒙除探索記憶也回憶自己的過去：從小在森林接受各項刺客訓練，但在渴望自由下于十六歲逃走，乘坐便車到達紐約后以酒保為業(yè)，最終被跨國制藥公司Abstergo尋獲和脅逼成為Animus實驗體，至此始后悔沒有重視刺客的訓練和承認自己乃一名刺客。

4、1511年3月，52歲的伊吉歐為了解刺客組織及目的而前往三百多年前刺客組織根據(jù)地－敘利亞城市馬西亞夫，發(fā)現(xiàn)當年作為刺客基地的堡壘已被宿敵圣殿騎士團占領(lǐng)，并獲悉阿泰爾在堡壘地底一密室內(nèi)藏了一件遺物，其力量能夠永久結(jié)束刺客與圣殿騎士團之間的戰(zhàn)爭。

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